Wykazanie GAD-65 jako głównej immunogennej izoformy dekarboksylazy glutaminianowej w cukrzycy typu 1 i oznaczanie autoprzeciwciał za pomocą radioligandu wytwarzanego przez ekspresję eukariotyczną.

Plazmidy zawierające cDNA dla szczurzych izoform 67- i 65-kD dekarboksylazy glutaminianowej (GAD-67 i GAD-65) ulegały ekspresji w komórkach COS, a lizaty komórek znakowanych [35S] metioniną były stosowane do immunoprecypitacji. Surowice od 38 pacjentów z cukrzycą typu (zależną od insuliny), która wytrąca antygen 64-kD ze szczurzych wysepek, reaguje z rekombinowanym GAD-65 w stosunku do ich miana anty-64-kD. Osiem najsilniejszych surowic również wytrąciło rekombinowany GAD-67, co sugeruje, że pewne epitopy są wspólne dla obu izoform. Następnie [35S] wyznakowany metioniną GAD-65 oczyszczono z lizatów komórek COS i zastosowano w teście wiązania z 50 surowic pacjentów z niedawnym pojawieniem się cukrzycy typu 1. 38 surowic (76%) wytrącił znakowany GAD-65 z mianami, które korelowały z przeciwciałami komórek wysp trzustkowych (ICA), określonymi w standardowym teście immunofluorescencyjnym. 2 surowice były pozytywne pod względem GAD, ale ujemne pod względem ICA, 4 były dodatnie tylko w przypadku ICA, a 6 było ujemne zarówno w przypadku GAD, jak i ICA, podobnie jak surowice 20 próbek kontrolnych. Dane pokazują, że przeciwciała przeciw GAD-65 są obecne u większości pacjentów z cukrzycą typu i że istnieją również autoprzeciwciała przeciwko innym antygenom komórek wyspowych. Test wiązania radioliganda, który jest wygodny i czuły do wykrywania przeciwciał przeciw GAD, ułatwi badania przesiewowe osób z autoimmunologiczną chorobą komórek wysp trzustkowych.
[patrz też: stwardnienie rozsiane objawy początkowe, rak kolczystokomórkowy, sla objawy ]