ortopeda nfz warszawa śródmieście

Następnie, stosując nasz model in situ usuwania pęcherzyków płucnych, ocenialiśmy funkcję nabłonka pęcherzyków płucnych w indukowanym przez MHC I uszkodzeniu płuc. Myszy traktowane PBS miały nienaruszony klirens płynu pęcherzykowego po 2 godzinach, zgodnie z wcześniej opublikowanymi wynikami (16, 17). Jednak myszy traktowane MHC I miały uszko- dzony klirens płynu w pęcherzyku płucnym w porównaniu z kontrolami PBS (figura 3C). Zatem tworzenie obrzęku płuc pokazanego na Figurze 1A odzwierciedla zarówno zwiększoną przepuszczalność naczyń płucnych i nabłonka płucnego do białka, jak i zmniejszoną zdolność do usuwania płynu obrzęku z pęcherzyków płucnych. Figura 3 mAb mAb 1H wytwarza zwiększoną przepuszczalność nabłonka pęcherzyków płucnych i zmniejszony klirens płynu pęcherzykowego. (A i B) Przepuszczalność nabłonka pęcherzykowego do albuminy wyznakowanej 125I (A) i białka całkowitego BAL (B) u myszy BALB / c, którym podano PBS (n = 6) lub mAb MHC I (n = 10). ** P <0,01. (C) Klirens płynu pęcherzykowego in situ mierzono przez 30 minut u myszy traktowanych mAb MHC I (n = 7) lub PBS (n = 6). * P <0,05. Myszy eksprymujące MHC I mAb rozwinęły ciężką sekwestrację neutrofili w płucach i neutropenię krwi obwodowej. Badanie histologiczne płuc myszy leczonych mAbp MHC I ujawniło oczywiste pogrubienie przegrody i ciężkie nacieki zapalne w ciągu 2 godzin po prowokacji mAb (Figura 4, porównaj A i B). Większość tych komórek zapalnych okazała się granulocytami, z których wiele zatkało rozgałęzione naczynia mikrokrążenia w miąższu płucnym (Figura 4C). Zwierzęta z oczywistymi klinicznymi dowodami obrzęku płuc przejawiały histologiczne dowody wewnątrz pęcherzykowego płynu białkowego (Figura 4D). Figura 4 Histologia płuc od myszy kontrolnych i myszy traktowanych mAb I MHC. (A i B) Widoki płuc o małej mocy od myszy, którym podano kontrolę (A) lub mAb MHC I (B). U myszy leczonej MHC I mAb stwierdzono wzrost liczby neutrofilów wewnątrznaczyniowych, pogrubienie przegrody i śródmiąższowe zapalenie. (C) Widok płucny dużej mocy od myszy otrzymującej mAb MHC I. Strzałka wskazuje rozgałęzione naczynie, które jest zaślepione neutrofilami. (D) Mysz traktowana MHC I mAb z wewnątrz-pęcherzykowym białkowym materiałem. Barwienie H & E. Powiększenie, × 200 (A i B); × 400 (C i D). W celu dalszego wyjaśnienia sekwestracji neutrofili u myszy traktowanych mAbp MHC1, przeprowadziliśmy immunohistochemię z użyciem mAb specyficznego dla neutrofili Gr-1. Ta immunohistochemia potwierdziła rozległą sekwestrację neutrofili w płucach 2 godziny po prowokacji mAb MHC I (Figura 5, A i B). Warto zauważyć, że tylko łagodna neutrofilia (0. 5%) w BAL u myszy eksponowanych na mAb w MHC I. We wczesnym punkcie czasowym 2 godzin (dane nie pokazane). Figura 5 myszy, którym podawano mAb5MHC I rozwijają sekwestrację neutrofili w płucach i neutropenię. (A i B) Widok płuc z małej mocy od myszy BALB / c, którym podano mAb PBS (A) lub MHC I (B) i zabarwiono mAb przeciwko neutrofilom Gr-1. Zwróć uwagę na rozległą sekwestrację neutrofili (brązowy kolor) w płucu myszy traktowanych MHC I. Powiększenie, × 200. (C) Poziomy neutrofili we krwi. Dwie godziny po wstrzyknięciu mAb PBS lub MHC I w porównaniu z wyjściowymi poziomami wstępnej iniekcji. * P <0,05. Neutropenia krwi obwodowej jest powszechnie obserwowana u pacjentów z TRALI, potencjalnie z powodu sekwestracji płuc krążących komórek (2, 18). Podobnie jak w przypadku ludzi, obserwowano również ostrą neutropenię u zwierząt leczonych mAb (MHC1) (Figura 5C). Małopłytkowość była również opisywana w niektórych przypadkach w ludzkiej literaturze TRALI (19. 21), ale w tym modelu eksperymentalnym nie wykryto żadnego z nich (dane nie przedstawione). Myszy traktowane MHC1 mAb mają selektywny wzrost cytokin i chemokin w osoczu. Analiza multipleksowej cytokiny wykazała znaczące różnice pomiędzy kontrolnymi i myszami traktowanymi MHC Ib w 3 cytokinach [więcej w: fenfluramina, olx kety, alpicort opinie ]